伟德国际1946源于英国應用生物科學專業課程介紹
普通微生物學實驗
Lab of Microbiology
理論課程編号：03610505j
适用專業：應用生物科學
實驗學時：16
總學分：0.5學分
開出實驗個數：綜合及設計性實驗4個
2、實驗課程簡介
普通微生物學實驗課是重要的專業基礎課，通過本課程的學習使學生掌握相關的理論知識，并在實驗棵中達到理論與實踐的結合。通過對微生物形态的觀察、培養基的制備、微生物無菌操作技能的掌握以及微生物的培養等實驗内容，使學生加深對微生物的感性認識，并掌握微生物學實驗室操作的基本技巧和無菌操作的基本概念。
3、實驗教學目标及基本要求
在本門課程的學習中我們将使學生基本掌握微生物實驗室操作規程、常用儀器的使用方法與原理，并具有初步解決相應問題的能力。培養和鍛煉學生在微生物學領域的基本實驗技能，為進行下一步生物技術及微生物專業課學習奠定良好實驗技能基礎。培養學生的觀察能力、動手能力、實踐操作能力和辯證思維能力，為今後從事教學、科研和生産工作打下紮實基礎。
基本要求是将側重培養學生的顯微鏡使用能力、制片能力和無菌操作能力和意識；培養學生嚴謹的科學态度，良好的實驗素質，分析問題和解決問題的獨立工作能力，通過實驗獲得的感性認識，從而能更深入理解微生物學基本概念和原理。
4、教材及主要參考書
《微生物學實驗》 沈萍等 主編 高等教育出版社 2009
《微生物學實驗手冊》 周德慶 主編 上海科技出版社 2012
《微生物學實驗》 錢存柔 主編 北京大學出版社 2013
《微生物學實驗》 趙斌 主編 北京科學出版社 2014
實驗一 顯微鏡油浸物鏡的使用及細菌的染色與形态的觀察
1、實驗特點：
類型：驗證 類别：專業基礎 計劃學時：4學時 每組人數：3人
2、實驗目的與要求：了解顯微鏡原理，掌握油鏡的使用方法，掌握簡單染色和革蘭氏染色方法。
3、主要儀器設備：
序号 |
主要儀器設備名稱 |
型号規格 |
數量 |
1 |
顯微鏡 |
OLMPUS |
10台 |
4、實驗内容提要：利用油鏡觀察細菌染色标本片子，并且同時繪圖。單染色和革蘭氏染色的過程。
5、實驗操作要點：油鏡浸入到油中後，要慢慢提升鏡頭，同時在目鏡中觀察。要嚴格控制各步染色的時間。
6
、注意事項：光線要亮度大、均勻；油不要加的太多；換片子時要提升鏡頭，以免擦傷鏡頭；使用完畢要注意保養鏡頭，并使顯微鏡還原成最初穩定狀态。滴水要少，取菌要少，塗菌面積要大、塗菌要均勻；酒精脫色是革蘭氏染色的關鍵步驟。
7、試驗材料：Rhodococcuserythropolis（紅平紅球菌）；Pseudomonas sp.（假單胞菌）。
8、試驗步驟：
9、思考與讨論：
實驗二 培養基配制及滅菌
1、實驗特點：
類型：驗證 類别：專業基礎 計劃學時：4學時 每組人數：3人
2、實驗目的與要求：掌握培養基的制備過程。
3、主要儀器設備：
序号 |
主要儀器設備名稱 |
型号規格 |
數量 |
1 |
手提式高壓滅菌器 |
DSX-288 |
3台 |
4、實驗内容提要：稱樣---溶解---調pH---定容---分裝---滅菌。
5、實驗操作要點：不同培養基的成分要求、配置過程及滅菌要求；棉塞制作；吸頭盒等不同類型用具滅菌方法。
6、注意事項： 注意藥品稱量順序，微量藥品的配置方法；培養基配制及藥品稱量，避免藥品殘留相互帶入雜志；溶解樣品時瓊脂要早加入、勤攪動；滅菌時，要按照操作規程進行，高壓滅菌器使用時注意安全；糖類不能再121℃30min；塑料都不可滅菌；各種瓶塞和試管塞不可擰太緊，保證透氣性，否則會緻使膨脹。
細菌、放線菌和絲狀真菌的培養基，操作動作要幹淨利落、試管管口要滅菌、試管不能迎風移動。
7、試驗材料：細菌、放線菌和絲狀真菌的培養基
牛肉膏蛋白胨培養基：牛肉膏 3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，H2O1000mL，pH7.0。
高氏1号合成培養基：澱粉 20g，FeSO4.7H2O 0.01g，NaCl 0.5g， MgSO4.7H2O 0.5g，K2HPO4.3H2O 0.5g， KNO3 1g， H2O 1000mL，pH7.0。
重鉻酸鉀溶液（300mL培養基加3%的重鉻酸鉀1mL）--高氏1号培養基在臨用時在已融化的培養基上加重鉻酸鉀溶液(重鉻酸鉀為一類緻癌物)，可抑制細菌和黴菌的生長。
PDA合成培養基：PDA粉37g，H2O 1000mL，pH6.0。
玫瑰紅(0.0133g/L PDA培養基，即13.3g/L,100 μL至100mL培養液中）：玫瑰紅不能高溫蒸汽滅菌，玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑制細菌的生長，并可減緩某些黴菌因生長過快而導緻菌落漫延生長。
8、試驗步驟： 培養基配置完成後立刻高溫高壓滅菌：1.05kg/cm2, 121℃, 20 min。
9、思考與讨論：
實驗三 微生物無菌操作技術及土壤微生物篩選與培養
1、實驗特點：
類型：綜合設計性 類别：專業基礎 計劃學時：4學時 每組人數：3人
2、實驗目的與要求：掌握無菌操作技術、不用類型微生物的分離與培養方法。
3、主要儀器設備：
序号 |
主要儀器設備名稱 |
型号規格 |
數量 |
1 |
超淨工作台 |
DL-CJ-2N |
3台 |
2 |
恒溫培養箱 |
|
3台 |
4、實驗内容提要：制固體平闆--稱樣--稀釋塗布、點樣法接種---恒溫培養。
5、實驗操作要點：無菌操作技術。
6、注意事項：
7、試驗材料：土壤樣品
8、試驗步驟：稀釋平闆法，點樣法
9、思考與讨論：
實驗四 微生物的純系分離及接種技術
1、實驗特點：
類型：驗證 類别：專業基礎 計劃學時：4學時 每組人數：3人
2、實驗目的與要求：掌握細菌、放線菌和黴菌稀釋分離、劃線分離等技術；學習從樣品中分離、純化出所需菌株。
3、主要儀器設備：
序号 |
主要儀器設備名稱 |
型号規格 |
數量 |
1 |
超淨工作台 |
DL-CJ-2N |
3台 |
2 |
恒溫培養箱 |
|
3台 |
4. 實驗内容提要：
a細菌單菌落,用接種絲接種--倒置培養
b真菌用接種勾接種--正置培養
c放線菌用滅菌牙簽沾無菌水接種----倒置培養
5、實驗操作要點：細菌、放線菌、絲狀真菌稀釋分離、劃線分離等技術。
6、注意事項： 培養細菌、放線菌、絲狀真菌微生物的培養條件和培養時間。
7、試驗材料：綜合實驗分離出的各類菌體。
8、試驗步驟：稀釋平闆法，點樣法
9、思考與讨論：
